🗊Презентация Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия

Категория: Физика
Нажмите для полного просмотра!
Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №1Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №2Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №3Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №4Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №5Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №6Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №7Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №8Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №9Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №10Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №11Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №12Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №13Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №14Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №15Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №16Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №17Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №18Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №19Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №20Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №21Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №22Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №23Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №24Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №25Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №26Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №27Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №28Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №29Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №30Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №31Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №32Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №33Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №34Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №35Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №36Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №37Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №38Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №39Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №40Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №41Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №42Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №43Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №44Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №45Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №46Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №47Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №48Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №49Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №50Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №51Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №52Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №53Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №54Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №55Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №56Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №57
Скачать

Содержание ▲

Вы можете ознакомиться и скачать презентацию на тему Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия. Доклад-сообщение содержит 57 слайдов. Презентации для любого класса можно скачать бесплатно. Если материал и наш сайт презентаций Mypresentation Вам понравились – поделитесь им с друзьями с помощью социальных кнопок и добавьте в закладки в своем браузере.

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1


Фотометрические методы биохимического анализа
Описание слайда:
Фотометрические методы биохимического анализа

Слайд 2


Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №2
Описание слайда:

Слайд 3


Методы сравнения стандартного и опытного образца Анализируемая и стандартная проба обрабатываются в одинаковых условиях При больших сериях – стандартную пробу исследовать в начале серии и через каждые 20 проб Расчет ведут по стандарту или по фактору Расчет по стандарту: Сi = Di х Cст/Dст Расчет по фактору: С = D х F
Описание слайда:
Методы сравнения стандартного и опытного образца Анализируемая и стандартная проба обрабатываются в одинаковых условиях При больших сериях – стандартную пробу исследовать в начале серии и через каждые 20 проб Расчет ведут по стандарту или по фактору Расчет по стандарту: Сi = Di х Cст/Dст Расчет по фактору: С = D х F

Слайд 4


Методы определения без использования калибратора Фотометрические единицы (в случае отсутствия калибратора – средние молекулы, серомукоид) – оптическую плотность умножают на 100 (D = 0,3, ответ – 30 единиц)
Описание слайда:
Методы определения без использования калибратора Фотометрические единицы (в случае отсутствия калибратора – средние молекулы, серомукоид) – оптическую плотность умножают на 100 (D = 0,3, ответ – 30 единиц)

Слайд 5


Методы определения без использования калибратора Определение концентрации по молярному показателю поглощения – применение закона Бургера С = D/lхξ (концентрация определяется делением измеренной оптической плотности на известный для данного вещества молярный показатель поглощения при длине волны измерения: С = D/ξ) Учитывать разведение образца
Описание слайда:
Методы определения без использования калибратора Определение концентрации по молярному показателю поглощения – применение закона Бургера С = D/lхξ (концентрация определяется делением измеренной оптической плотности на известный для данного вещества молярный показатель поглощения при длине волны измерения: С = D/ξ) Учитывать разведение образца

Слайд 6


Примеры: Определение концентрации НАДН на основе определения оптической плотности Молярный показатель НАДН при 340 нм 6,22х10 3 лхмоль -1см-1. (ввести верхний символ). Измерена оптическая плотность в 1 см кювете – 0,38 Концентрация НАДН определяется по соотношению
Описание слайда:
Примеры: Определение концентрации НАДН на основе определения оптической плотности Молярный показатель НАДН при 340 нм 6,22х10 3 лхмоль -1см-1. (ввести верхний символ). Измерена оптическая плотность в 1 см кювете – 0,38 Концентрация НАДН определяется по соотношению

Слайд 7


Измерение скорости изменения поглощения Фотометрические измерения проводят непосредственно при протекании реакции Потребление субстратов Повышение концентрации продуктов Изменение кофакторов (оптический тест Варбурга)
Описание слайда:
Измерение скорости изменения поглощения Фотометрические измерения проводят непосредственно при протекании реакции Потребление субстратов Повышение концентрации продуктов Изменение кофакторов (оптический тест Варбурга)

Слайд 8


Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №8
Описание слайда:

Слайд 9


Сопряженные реакции
Описание слайда:
Сопряженные реакции

Слайд 10


При кинетическом определении вычисляют изменение поглощения за 1 минуту F
Описание слайда:
При кинетическом определении вычисляют изменение поглощения за 1 минуту F

Слайд 11


Единицы активности ферментов Катал – количество фермента, превращающего 1 моль субстата за 1 сек МЕ - количество фермента, превращающего 1 мкмоль субстата за 1минуту МЕ/л↔0,0167 мккат/л или МЕ/л↔16,7 нкат/л
Описание слайда:
Единицы активности ферментов Катал – количество фермента, превращающего 1 моль субстата за 1 сек МЕ - количество фермента, превращающего 1 мкмоль субстата за 1минуту МЕ/л↔0,0167 мккат/л или МЕ/л↔16,7 нкат/л

Слайд 12


Измерение по конечной точке Реакция развивается за некоторый период времени и достигает определенного конечного состояния (конечная точка) При измерении по конечной точке уровень сигнала соответствует количеству продуктов реакции в инкубационной среде после фиксированного времени инкубации Поглощение измеряется после окончания реакции при стабильном значении сигнала
Описание слайда:
Измерение по конечной точке Реакция развивается за некоторый период времени и достигает определенного конечного состояния (конечная точка) При измерении по конечной точке уровень сигнала соответствует количеству продуктов реакции в инкубационной среде после фиксированного времени инкубации Поглощение измеряется после окончания реакции при стабильном значении сигнала

Слайд 13


1-точечное измерение на двухлучевом фотометре Измерение ведется в режиме сравнения растворов в двух кюветах В каждую кювету вносится одинаковое количество реактива, в 1-ую – проба с известной концентрацией (стандартная), в другую – такое же кол-во воды (физ. р-ра) – бланк. Бланк автоматически вычитается
Описание слайда:
1-точечное измерение на двухлучевом фотометре Измерение ведется в режиме сравнения растворов в двух кюветах В каждую кювету вносится одинаковое количество реактива, в 1-ую – проба с известной концентрацией (стандартная), в другую – такое же кол-во воды (физ. р-ра) – бланк. Бланк автоматически вычитается

Слайд 14


Измерение с бланком на однолучевом фотометре Для исключения систематического влияния (рабочий реактив, отражение от стенок кювет, темновой ток) используют измерение относительно холостой пробы (бланка) Бланк определяют по рабочему реактиву перед измерением пробы Dпробы = Dконечной точки – Dбланка Процедура сходна с одноточечным измерением, но учет бланка проводится в ручном режиме
Описание слайда:
Измерение с бланком на однолучевом фотометре Для исключения систематического влияния (рабочий реактив, отражение от стенок кювет, темновой ток) используют измерение относительно холостой пробы (бланка) Бланк определяют по рабочему реактиву перед измерением пробы Dпробы = Dконечной точки – Dбланка Процедура сходна с одноточечным измерением, но учет бланка проводится в ручном режиме

Слайд 15


Рабочая таблица для определения концентрации методом измерения с бланком по рабочему реактиву
Описание слайда:
Рабочая таблица для определения концентрации методом измерения с бланком по рабочему реактиву

Слайд 16


Измерение с прозоной Разновидность измерения с бланком Измерение в одной кювете, отсутствует кювета сравнения Проводят определение до прибавления биопробы Характерен для биохимических анализаторов (двухточечное измерение с прозоной) Прозона – временной период до добавления в кювету пробы. При добавлении нескольких реактивов прозона определяется при достижении стабильного состояния после внесения всех реактивов перед пробой
Описание слайда:
Измерение с прозоной Разновидность измерения с бланком Измерение в одной кювете, отсутствует кювета сравнения Проводят определение до прибавления биопробы Характерен для биохимических анализаторов (двухточечное измерение с прозоной) Прозона – временной период до добавления в кювету пробы. При добавлении нескольких реактивов прозона определяется при достижении стабильного состояния после внесения всех реактивов перед пробой

Слайд 17


Двухволновое измерение с опорной длиной волны Необходимо для исключения мешающих факторов (гемолиз, иктеричность, липемичность, использование исчерченных кювет) Измерение проводят на 2 длинах волн – основной и поддерживающей Измеряется только сигнал, связанный с аналитом Может применяться на приборах, у которых кювета облучается белым светом, а монохроматор расположен после кюветы Опорная волна не должна отступать от основной более, чем на 100 нм
Описание слайда:
Двухволновое измерение с опорной длиной волны Необходимо для исключения мешающих факторов (гемолиз, иктеричность, липемичность, использование исчерченных кювет) Измерение проводят на 2 длинах волн – основной и поддерживающей Измеряется только сигнал, связанный с аналитом Может применяться на приборах, у которых кювета облучается белым светом, а монохроматор расположен после кюветы Опорная волна не должна отступать от основной более, чем на 100 нм

Слайд 18


Принцип получения информации о степени иктеричности, липемичности и гемолиза сывортки 20 мкл сыворотки, смешать с 200 мкл дистиллированной воды, добавить 600 мкл 0,15 М фосфатный буфер (рН = 7,4) Раствор измеряется при длинах волн 460, 500, 576, 597, и 750 нм Вычисляются ∆D 460/500 (разность плотностей) (иктеричность) ∆D 576/597 (разность плотностей) (гемолитичность) ∆D 597/750 (разность плотностей) (липемичность)
Описание слайда:
Принцип получения информации о степени иктеричности, липемичности и гемолиза сывортки 20 мкл сыворотки, смешать с 200 мкл дистиллированной воды, добавить 600 мкл 0,15 М фосфатный буфер (рН = 7,4) Раствор измеряется при длинах волн 460, 500, 576, 597, и 750 нм Вычисляются ∆D 460/500 (разность плотностей) (иктеричность) ∆D 576/597 (разность плотностей) (гемолитичность) ∆D 597/750 (разность плотностей) (липемичность)

Слайд 19


Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №19
Описание слайда:

Слайд 20


Кинетические измерения Определение меняющейся в ходе реакции оптической плотности Широко используется для определения активности ферментов Требует точного поддержания температуры в измерительной кювете (+ 0,1º С), правильного отсчета временных интервалов Условия обязательны, доступны только при использовании современных фотометров и биохимических анализаторов
Описание слайда:
Кинетические измерения Определение меняющейся в ходе реакции оптической плотности Широко используется для определения активности ферментов Требует точного поддержания температуры в измерительной кювете (+ 0,1º С), правильного отсчета временных интервалов Условия обязательны, доступны только при использовании современных фотометров и биохимических анализаторов

Слайд 21


Корректирующие температурные коэффициенты для активности ферментов
Описание слайда:
Корректирующие температурные коэффициенты для активности ферментов

Слайд 22


Измерение по кинетике
Описание слайда:
Измерение по кинетике

Слайд 23


Измерение по двум точкам При постоянной скорости кинетической реакции измерение можно проводить на любом отрезке линейной кривой, приводя поглощение к 1 мин. Достоинства – простота, возможность измерения без стандарта, независимость в пределах линейного диапазона. Допустим при повторном использовании разовых кювет Следует убедиться что измерение проводится в линейном диапазоне
Описание слайда:
Измерение по двум точкам При постоянной скорости кинетической реакции измерение можно проводить на любом отрезке линейной кривой, приводя поглощение к 1 мин. Достоинства – простота, возможность измерения без стандарта, независимость в пределах линейного диапазона. Допустим при повторном использовании разовых кювет Следует убедиться что измерение проводится в линейном диапазоне

Слайд 24


Измерение по двум точкам Возможны методические ошибки Если реакция начинается с очень высокой скоростью, то она может замедлиться или прекратиться из-за потребления всего субстрата. Несоответствие выявляется при сопоставлении клинических данных и биохимических исследований Реакция может иметь нелинейный характер
Описание слайда:
Измерение по двум точкам Возможны методические ошибки Если реакция начинается с очень высокой скоростью, то она может замедлиться или прекратиться из-за потребления всего субстрата. Несоответствие выявляется при сопоставлении клинических данных и биохимических исследований Реакция может иметь нелинейный характер

Слайд 25


Измерение по двум точкам Реакция может задержаться на старте (Lag-фаза в мультиферментных системах) Обусловлена, по-видимому, задержкой образованием фермент-субстратного комплекса. Может продолжаться до нескольких минут Имеет значение порядок внесения реактивов – для лучшего перемешивания реактив большего объема добавлять к меньшему объему. В измерительную кювету вносится сначала проба, а затем рабочий реактив.
Описание слайда:
Измерение по двум точкам Реакция может задержаться на старте (Lag-фаза в мультиферментных системах) Обусловлена, по-видимому, задержкой образованием фермент-субстратного комплекса. Может продолжаться до нескольких минут Имеет значение порядок внесения реактивов – для лучшего перемешивания реактив большего объема добавлять к меньшему объему. В измерительную кювету вносится сначала проба, а затем рабочий реактив.

Слайд 26


Многоточечное измерение Позволяет оценивать характер кинетики и выбирать для расчетов линейный участок Является наиболее точным методом определения активности ферментов Изменение оптического поглощения должно быть одинаковым за равные промежутки времени (отклонение от линейности не должно превышать 10%)
Описание слайда:
Многоточечное измерение Позволяет оценивать характер кинетики и выбирать для расчетов линейный участок Является наиболее точным методом определения активности ферментов Изменение оптического поглощения должно быть одинаковым за равные промежутки времени (отклонение от линейности не должно превышать 10%)

Слайд 27


Многоточечное измерение Измерение по начальной скорости Скорость увеличивается в зависимости от количества фермента при одинаковой начальной концентрации субстрата Возникает в случае малого количества фермента Плато достигается, но время его достижения может быть большим. Регистрацию ведут на нелинейном участке
Описание слайда:
Многоточечное измерение Измерение по начальной скорости Скорость увеличивается в зависимости от количества фермента при одинаковой начальной концентрации субстрата Возникает в случае малого количества фермента Плато достигается, но время его достижения может быть большим. Регистрацию ведут на нелинейном участке

Слайд 28


Измерение по начальной скорости Измерение скорости реакции. Регистрируется изменение в каждый момент времени светопропускания. Показатель, соответствующий максимальной скорости – значение максимальной скорости изменения оптического поглощения. Доступен только автоматическим анализаторам
Описание слайда:
Измерение по начальной скорости Измерение скорости реакции. Регистрируется изменение в каждый момент времени светопропускания. Показатель, соответствующий максимальной скорости – значение максимальной скорости изменения оптического поглощения. Доступен только автоматическим анализаторам

Слайд 29


Многоточечное измерение Кинетический метод с коррекцией по бланку образца Используется для определения активности ферментов и количественного измерения концентрации субстратов Одновременно может меняться бланк рабочего реактива
Описание слайда:
Многоточечное измерение Кинетический метод с коррекцией по бланку образца Используется для определения активности ферментов и количественного измерения концентрации субстратов Одновременно может меняться бланк рабочего реактива

Слайд 30


Современные приборы способны определять и отслеживать избыток антигенов автоматически (регистрация ускорения реакции после добавления дополнительного количества антигена –малые дозы калибратора) При постановке на обычном фотометре необходимо знать диагноз. Избыток антигена наблюдается в чрезвычайной ситуации. При миеломной болезни концентрация IgG может быть очень высокой, и исследование попадает в зону избытка антигена. Необходимо электрофоретическое исследование В качестве стандартов и контрольных материалов необходимо использовать стандарты и сыворотки, содержащие индивидуальные белки, концентрация которых измерена с использованием иммунохимической реакции
Описание слайда:
Современные приборы способны определять и отслеживать избыток антигенов автоматически (регистрация ускорения реакции после добавления дополнительного количества антигена –малые дозы калибратора) При постановке на обычном фотометре необходимо знать диагноз. Избыток антигена наблюдается в чрезвычайной ситуации. При миеломной болезни концентрация IgG может быть очень высокой, и исследование попадает в зону избытка антигена. Необходимо электрофоретическое исследование В качестве стандартов и контрольных материалов необходимо использовать стандарты и сыворотки, содержащие индивидуальные белки, концентрация которых измерена с использованием иммунохимической реакции

Слайд 31


Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов
Описание слайда:
Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов

Слайд 32


Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование
Описание слайда:
Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование

Слайд 33


Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование
Описание слайда:
Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование

Слайд 34


Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование
Описание слайда:
Фотометрические схемы измерения оптического поглощения растворов Двухлучевое фотометрирование

Слайд 35


Волоконный световод минимизирует оптическую схему
Описание слайда:
Волоконный световод минимизирует оптическую схему

Слайд 36


Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №36
Описание слайда:

Слайд 37


Рассеяние света Мутный раствор в кювете - поглощает свет (если окрашен) - частично проходит, не изменяя направления (трансмиссия) - частично рассеивается, изменяя направление под различными углами (рассеивание)
Описание слайда:
Рассеяние света Мутный раствор в кювете - поглощает свет (если окрашен) - частично проходит, не изменяя направления (трансмиссия) - частично рассеивается, изменяя направление под различными углами (рассеивание)

Слайд 38


Рассеяние света Трансмиссия и рассеивание зависят от - длины волны светового потока - частоты светового потока - интенсивности светового потока - свойств рассеивающей среды (размера и формы частиц, количества, способности к поляризации и др) Если в процессе измерения размер частиц в растворе меняется, будет меняться поток проходящего и рассеивающего света
Описание слайда:
Рассеяние света Трансмиссия и рассеивание зависят от - длины волны светового потока - частоты светового потока - интенсивности светового потока - свойств рассеивающей среды (размера и формы частиц, количества, способности к поляризации и др) Если в процессе измерения размер частиц в растворе меняется, будет меняться поток проходящего и рассеивающего света

Слайд 39


Определение светорассеивания Зависит от длины волны (λ) Диаметра частиц, на которых происходит рассеивание Если размер частиц значительно меньше длины волны светового потока (<λ/10) – упругое рассеяние
Описание слайда:
Определение светорассеивания Зависит от длины волны (λ) Диаметра частиц, на которых происходит рассеивание Если размер частиц значительно меньше длины волны светового потока (<λ/10) – упругое рассеяние

Слайд 40


Интенсивность потока, рассеиваемого небольшими частицами, подчиняется уравнению Релея
Описание слайда:
Интенсивность потока, рассеиваемого небольшими частицами, подчиняется уравнению Релея

Слайд 41


В основе рассеяния малых частиц лежит явление дифракции Рассеяние света каждой частицей не зависит друг от друга. Рассеянный свет распространяется во всех направлениях Максимальное количество света рассеивается под углом 0 и 180º При λ 400нм – такой тип рассеивания характерен для частиц диаметром < 40 нм (иммуноглобулины,β- липопротеины, альбумин)
Описание слайда:
В основе рассеяния малых частиц лежит явление дифракции Рассеяние света каждой частицей не зависит друг от друга. Рассеянный свет распространяется во всех направлениях Максимальное количество света рассеивается под углом 0 и 180º При λ 400нм – такой тип рассеивания характерен для частиц диаметром < 40 нм (иммуноглобулины,β- липопротеины, альбумин)

Слайд 42


При увеличении размеров частиц (40-400 нм)рассеивание становится несимметричным Максимальное количество света рассеивается в направлении падающего луча При λ 400нм (Ig M, хиломикроны, формирующиеся комплексы антигенов с иммуноглобулинами)
Описание слайда:
При увеличении размеров частиц (40-400 нм)рассеивание становится несимметричным Максимальное количество света рассеивается в направлении падающего луча При λ 400нм (Ig M, хиломикроны, формирующиеся комплексы антигенов с иммуноглобулинами)

Слайд 43


При превышении длины света (диаметр > 400 нм) несимметричность светорассеяния увеличивается Характерен для взвеси бактерий, клеток крови (тромбоциты, эритроциты)
Описание слайда:
При превышении длины света (диаметр > 400 нм) несимметричность светорассеяния увеличивается Характерен для взвеси бактерий, клеток крови (тромбоциты, эритроциты)

Слайд 44


Нефелометрия Измерение рассеянного света Сравнивая величины рассеянного и падающего света можно определять концентрацию вещества в растворе
Описание слайда:
Нефелометрия Измерение рассеянного света Сравнивая величины рассеянного и падающего света можно определять концентрацию вещества в растворе

Слайд 45


Оптическая схема нефелометра
Описание слайда:
Оптическая схема нефелометра

Слайд 46


Турбидиметрия Измерение прошедшего света Турбидиметры построены по типу фотометров
Описание слайда:
Турбидиметрия Измерение прошедшего света Турбидиметры построены по типу фотометров

Слайд 47


Турбидиметрия Выражение, подобное закону Бугера-Ламберта для окрашенных растворов t – молярный коэффициент мутности раствора (турбидность) В качестве турбидиметров можно использовать большинство фотометров и биохимических анализаторов Обычно используются короткие волны (340 нм), т.к. доля рассеянного света увеличивается обратно пропорционально четвертой степени длины волны – т.е. при меньшей длине волны прошедший свет будет составлять большую часть от падающего, для более короткого ультрафиолета нужна специальная оптика
Описание слайда:
Турбидиметрия Выражение, подобное закону Бугера-Ламберта для окрашенных растворов t – молярный коэффициент мутности раствора (турбидность) В качестве турбидиметров можно использовать большинство фотометров и биохимических анализаторов Обычно используются короткие волны (340 нм), т.к. доля рассеянного света увеличивается обратно пропорционально четвертой степени длины волны – т.е. при меньшей длине волны прошедший свет будет составлять большую часть от падающего, для более короткого ультрафиолета нужна специальная оптика

Слайд 48


Турбидиметрия и нефелометрия Используются для определения индивидуальных белков Особенность – построение калибровочного графика с использованием не менее пяти концентраций (калибровочный график имеет нелинейный характер)
Описание слайда:
Турбидиметрия и нефелометрия Используются для определения индивидуальных белков Особенность – построение калибровочного графика с использованием не менее пяти концентраций (калибровочный график имеет нелинейный характер)

Слайд 49


Кривая доза-эффект При взаимодействии антиген-антитело образуют агрегаты
Описание слайда:
Кривая доза-эффект При взаимодействии антиген-антитело образуют агрегаты

Слайд 50


Кривая доза-эффект При пропорциональной концентрации антигенов и антител комплекс выпадает в осадок – преципитат. В супернатанте не определяются антитела и антигены – эквивалентное состояние
Описание слайда:
Кривая доза-эффект При пропорциональной концентрации антигенов и антител комплекс выпадает в осадок – преципитат. В супернатанте не определяются антитела и антигены – эквивалентное состояние

Слайд 51


Кривая доза-эффект При увеличении концентрации антигенов количество антител недостаточно для полного связывания белка. Частицы иммунных комплексов становятся мелкими, преципитат не формируется. В супернатанте – свободные антигены – антиген-эксцесс
Описание слайда:
Кривая доза-эффект При увеличении концентрации антигенов количество антител недостаточно для полного связывания белка. Частицы иммунных комплексов становятся мелкими, преципитат не формируется. В супернатанте – свободные антигены – антиген-эксцесс

Слайд 52


Кривая доза-эффект Классическая преципитационная кривая Хайдельберга-Кендаля
Описание слайда:
Кривая доза-эффект Классическая преципитационная кривая Хайдельберга-Кендаля

Слайд 53


Калибровочный график Строится для -каждого индивидуального белка -каждого прибора -при любом условий регистрации -периодически при проведении исследований При серийных исследованиях в стандартных условиях допускается корректировка графика на основании измерения одного из стандартов. (вид стандартной кривой не меняется из-за влияния систематических факторов, происходит параллельный сдвиг всего графика)
Описание слайда:
Калибровочный график Строится для -каждого индивидуального белка -каждого прибора -при любом условий регистрации -периодически при проведении исследований При серийных исследованиях в стандартных условиях допускается корректировка графика на основании измерения одного из стандартов. (вид стандартной кривой не меняется из-за влияния систематических факторов, происходит параллельный сдвиг всего графика)

Слайд 54


Состав реакционной смеси подбирается так, чтобы измерение производилось в зоне избытка антител. При очень высокой концентрации белка антител недостаточно, частицы преципитата становятся мелкими (нисходящая часть кривой) – с увеличением концентрации белка сигнал прибора уменьшается. Может быть выдан неправильный результат. Проводят разведение биологической жидкости Если сигнал увеличивается – определение проводилось в нисходящей части кривой Разведение проводят до степени избытка антител
Описание слайда:
Состав реакционной смеси подбирается так, чтобы измерение производилось в зоне избытка антител. При очень высокой концентрации белка антител недостаточно, частицы преципитата становятся мелкими (нисходящая часть кривой) – с увеличением концентрации белка сигнал прибора уменьшается. Может быть выдан неправильный результат. Проводят разведение биологической жидкости Если сигнал увеличивается – определение проводилось в нисходящей части кривой Разведение проводят до степени избытка антител

Слайд 55


Современные приборы способны определять и отслеживать избыток антигенов автоматически (регистрация ускорения реакции после добавления дополнительного количества антигена –малые дозы калибратора) При постановке на обычном фотометре необходимо знать диагноз. Избыток антигена наблюдается в чрезвычайной ситуации. При миеломной болезни концентрация IgG может быть очень высокой, и исследование попадает в зону избытка антигена. Необходимо электрофоретическое исследование В качестве стандартов и контрольных материалов необходимо использовать стандарты и сыворотки, содержащие индивидуальные белки, концентрация которых измерена с использованием иммунохимической реакции
Описание слайда:
Современные приборы способны определять и отслеживать избыток антигенов автоматически (регистрация ускорения реакции после добавления дополнительного количества антигена –малые дозы калибратора) При постановке на обычном фотометре необходимо знать диагноз. Избыток антигена наблюдается в чрезвычайной ситуации. При миеломной болезни концентрация IgG может быть очень высокой, и исследование попадает в зону избытка антигена. Необходимо электрофоретическое исследование В качестве стандартов и контрольных материалов необходимо использовать стандарты и сыворотки, содержащие индивидуальные белки, концентрация которых измерена с использованием иммунохимической реакции

Слайд 56


Фотометрические методы биохимического анализа. Турбидиметрия и нефелометрия, слайд №56
Описание слайда:

Слайд 57


КЛИНИЧЕСКИЙ СПЕКТРОФОТОМЕТР
Описание слайда:
КЛИНИЧЕСКИЙ СПЕКТРОФОТОМЕТР

Скачать

Похожие презентации
Mypresentation.ru
Загрузить презентацию