🗊Презентация Клиническая биохимия азотистого обмена. (Лекция 7)

Лекция 7 Клиническая биохимия азотистого обмена

Азотсодержащие вещества тканей Белки Аминокислоты Мочевина Креатин, креатинфосфат, креатинин Биогенные амины Холин Нуклеиновые основания и кислоты Мочевая кислота Гетерополисахариды Сфингомиелины Порфирины: гем, цитохромы Билирубин Аммиак и др.

Белки

Гипопротеинемия Абсолютная: Острое и хроническое воспаление инфекции (Вирусные, большинство бактериальных, некоторые паразитарные). Ревматические болезни. ожоги. Некроз ткани. Понижение синтеза в печени Печеночно-клеточная недостаточность. нарушения питания. злокачественные новообразования. сердечная недостаточность. врожденная анальбуминемия. Беременность

Увеличение потерь белка из организма Увеличение потерь белка из организма Нефротический синдром. ожоги. Травмы и раздавливание тканей. Транссудация или экссудация из полых органов или эпителиальных поверхностей. После кровотечений и введения кровозамещающих жидкостей. Желудочно-кишечные и лимфатические фистулы.   Повышение катаболизма Повышенная температура тела. Семейная идиопатическая гипопротеинемия. Состояния гиперметаболизма гормонального происхождения ( тиреотоксикоз, некоторые злокачественные новообразования). Относительная: Повышение объёма крови (гиперволемия)

Гиперпротеинемия – повышение белка в крови Абсолютная: миеломной болезни и болезни Вальдемстрема – связанные с повышенным образованием патологических белков; Относительная: дегидратации организма при: травмах, ожогах, тяжелых инфекциях.

Определение отдельных белков

Альбумин ПРИНЦИП Альбумин взаимодействует с бромкрезоловым зеленым при рН 4,2. Оптическая плотность образующегося желто-зеленого комплекса, измеряемая при 630 нм, прямо пропорционально концентрации альбумина в пробе

Диагностическое значение альбумина

Определение фракций белков

Фракционирование белков Электрофорез – разделение веществ имеющих разную массу и заряд в постоянном электрическом поле на целлюлозе выделяют 5 белковых фракций, в агаровом геле — 7—8, в крахмальном геле — 16—18, методом иммуноэлектрофореза — около 30 Высаливание - разделение белков в растворах солей щелочноземельных металлов разной концентрации (3 фракции: альбумины, глобулины и фибриноген) Осаждение в спиртовом растворе - разделение белков в спиртовых растворах разной концентрации

Электрофорез

Фракции белков на целлюлозе

Патологии связанные с нарушением обмена небелкового азота крови

Уровень мочевины

Уровень аммиака

Наследственные нарушения орнитинового цикла и их основные проявления

Цитруллинемия 3. Аргининосукцинатсинтетаза Аутосомнорецессивный Гипераммониемия тяжёлая у новорождённых. У взрослых — после белковой нагрузки Кровь: ↑Цитруллин, ↑NH3 Моча: ↑Цитруллин

Аргининосукцинатурия 4. Аргининосукцинатлиаза Аутосомнорецессивный Гипераммониемия, атаксия, судороги, выпадение волос Кровь: ↑Аргининосукцинат NH3 Моча: ↑Аргининосукцинат, Глн, Ала, Лиз

Гипераргининемия 5. Аргиназа Аутосомнорецессивный Гипераргининемия Кровь: ↑Apг,NH3 Моча: ↑Apг, Лиз, Орнитин

Клинические проявления дефектов орнитинового цикла Дебют – рвота после кормления Нарушение сознания Судороги (инфантильные спазмы) Респираторный дистресс-синдром Гипотермия Синдром «внезапной смерти младенца»

Методы диагностики наследственных заболеваний ПЦР Масс-спектрометрия Хроматография Иммунологический анализ Биохимический анализ Люминесцентный анализ

Схема диагностики наследственных патологий

1. Диагностика на уровне мутантного гена Если биохимический дефект неизвестен Б/х диагностика затруднена, недостаточно достоверна или требует инвазивных методик взятия материала Для пренатальной диагностики Для идентификация гетерозиготных носителей

2. Биохимическая диагностика На уровне метаболитов Материал – биологические жидкости, пятна сухой крови Метод – Хроматография, тандемная масс-спектрометрия

Этапы биохимической диагностики Массовый скрининг (неонатальный скрининг) Селективный скрининг Уточняющая диагностика

А. Неонатальный скрининг В СО с 1991 года – ФКУ В настоящее время в РФ – ФКУ, муковисцидоз, адреногенитальный синдром, галактоземия, врожденный гипотиреоз

Спектр скринируемых заболеваний Фенилкетонурия (ПЦР) врожденный гипотиреоз (ПЦР, ТТГ, Т4) Муковисцидоз (ПЦР, натрий, хлор в поте) адреногенитиальный синдром (ПЦР, 17-ОНП) Галактоземия (галактоза) лейциноз множественная карбоксилазная недостаточность глютаровая ацидурия I типа изовалериановая ацидемия тирозинемия I типа метилмалоновая ацидемия пропионовая ацидемия цитруллинемия недостаточность среднецепочечной ацил-коэнзимА-дегидрогеназы недостаточность трифункционального белка недостаточность очень длинноцепочечной ацил-коэнзимА-дегидрогеназы

Б. Селективный скрининг Сходные случаи заболевания в семье Синдром «внезапной смерти младенца» Развитие метаболических кризов после периода нормального развития Необычный запах мочи и тела Неврологические симптомы – потеря навыков нервно-психического развития, судороги, комы Поражение внутренних органов Лабораторные сдвиги

Дифференциальные признаки ГИПЕРАМИНОАЦИДЕМИЙ Специфический запах мочи и тела «Сладкий» – Лейциноз «Вареной капусты» – Тирозинемия I «Потных ног», «сыра» – Изовалериановая ацидурия «Кошачьей мочи» – 3- гидрокси-изовалериановая ацидурия «Мышиный» – Фенилкетонурия «Рыбный» – тирозинемия II Изменение цвета на воздухе - алкаптонурия

Наследственные нарушения глицина: Глицинурия – характеризуется повышенным выделением глицина с мочой (до 1 г/сут). Причина – нарушение реабсорбции глицина в почках. Гиперглицинемия – характеризуется повышенной концентрацией глицина в крови в следствии дефекта глицинрасщепляющей ферментной системой (глицинсинтазы).

Первичная гипероксалатурия – характеризуется постоянным выделением оксалата с мочой. Первичная гипероксалатурия – характеризуется постоянным выделением оксалата с мочой. Дефект глицинаминотрансферазы блокирует превращение глиоксилата в глицин:

Нарушения обмена метионина Цистотионинурия – характеризуется выделением цистатионина с мочой. Этот процесс вызывается блокированием реакции распада цистотионина на гомосерин и цистеин. Гомоцитинурия – является следствием наследственной недостаточности цистатионин--синтетазы, гиповитаминозов В9, В6 и В12;

Классическая Фенилкетонурия Наследственное заболевание, связанное с мутациями в гене фенилаланинмонооксигеназы (частота 1:10000 новорожденных), которые приводят к снижению активности фермента или полной его инактивации.

Фенилкетонурия – клинико-диагностическая панель возможный родственный брак родителей больного ребенка; аналогичная патология у родных или двоюродных сибсов (братьев или сестер); судороги, нарушение мышечного тонуса; экзематозные изменения кожи; гипопигментация волос, кожи, радужной оболочки глаз; «мышиный» запах мочи;

Биохимическая диагностическая панель повышенный уровень фенилаланина в крови > 900 мкМоль/л; присутствие в моче фенилпировиноградной, фенилмолочной, фенилуксусной кислот; положительная проба Феллинга. анализ наиболее частых мутаций в гене PAH (ФАГ) методом ПЦР генах других ферментов – PTS и QDPR и др.

Нарушения обмена тирозина 1. Болезнь Паркинсона – развивается при гибели дофаминергических нейронов в чёрном веществе и др. дофаминсодержащих областях мозга и уменьшении содержания дофамина в хвостатом ядре и скорлупе. Частота 1:200 среди людей старше 60 лет.

2. Альбинизм – развивается при наследственном отсутствии или блокады тирозиназы (1:20000). Проявляется отсутствием пигментации кожи, сетчатки глаз и волос 2. Альбинизм – развивается при наследственном отсутствии или блокады тирозиназы (1:20000). Проявляется отсутствием пигментации кожи, сетчатки глаз и волос

3. Алкаптонурия – развивается при дефекте диоксигеназы гомогентизиновой кислоты. Клиническим проявлением является потемнение мочи на воздухе, охроноз, артрит; 3. Алкаптонурия – развивается при дефекте диоксигеназы гомогентизиновой кислоты. Клиническим проявлением является потемнение мочи на воздухе, охроноз, артрит;

4. Тирозинемии: 4. Тирозинемии: I-типа (тирозиноз) – развивается при дефекте фермента фумарилацетоацетатгидролазы

4. Тирозинемии: 4. Тирозинемии: II-типа (синдром Рихнера- Ханхорта) – развивается при дефекте фермента тирозинаминотрансферазы;

4. Тирозинемии: 4. Тирозинемии: III-типа тирозинемия - возникает в результате недостаточности гидроксифенилпируватдиоксигеназы

Болезнь Кленового Сиропа

Болезнь «кленового сиропа» мочи Кома Рвота Отсутствие интереса к окружающему Альтернирующее нарушение мышечного тонуса Запах кленового сиропа

Нарушения обмена триптофана Болезнь Хартнапа: Впервые описана Baron с соавт. в 1956 году. Аутосомно- рецессивный тип наследования. Наблюдается генетическое изменение транспортной функции клеток слизистой оболочки кишечника и проксимальных отделов почечных канальцев. Это ведет к изолированному дефекту транспорта моноаминокарбоновых кислот. Нарушение кишечной абсорбции триптофана приводит к его бактериальному расщеплению в кишечнике до индола и индоксила. Генерализованная аминоацидурия обусловлена нарушением канальцевой реабсорбции. дефицит триптофана в крови, эндогенный дефицит никотиновой кислоты. Гипераминацидурия без повышения концентрации аминокислот в крови, повышенное выделение с мочой индольных соединений. Одним из типичных признаков синдрома является повышенная чувствительность кожи к ультрафиолетовым лучам — появление гиперемии, шелушения, пузырей, изменения кожи могут напоминать пеллагру. Со стороны нервной системы отмечаются атаксия, хореоформный гиперкинез, интенционный тремор, повышение периостальных рефлексов, нистагм, нарушение конвергенции. Изменения психики проявляются депрессией, фобиями, галлюцинациями, а также умственной отсталостью.Имеется склонность к коллаптоидным состояниям, сильным головным болям. Могут отмечаться боли в животе, диарея. Описывают гепатоспленомегалию, остеопороз.

Нарушения обмена глутамата Эпилепсия - хроническое заболевание головного мозга человека. Характеризуется повторными припадками; Расстройства вестибулярной системы; Ишемии – заболевание, характеризующееся уменьшением кровоснабжения участка тела, органа или ткани вследствие ослабления или прекращения притока к нему артериальной крови;

Уровень креатинина

Спасибо за внимание!