Жидкостная хроматография - презентация, доклад, проект скачать

Нажмите для полного просмотра!

Содержание ▲

Вы можете ознакомиться и скачать презентацию на тему Жидкостная хроматография. Доклад-сообщение содержит 45 слайдов. Презентации для любого класса можно скачать бесплатно. Если материал и наш сайт презентаций Mypresentation Вам понравились – поделитесь им с друзьями с помощью социальных кнопок и добавьте в закладки в своем браузере.

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1

Описание слайда:

АО «Медицинский университет Астана» кафедра фармацевтических дисциплин Тема: «Жидкостная хроматография» Подготовила: Карашутова В. 203-фарм Проверила: Арыстанова Т.А. Астана, 2016

Слайд 2

Описание слайда:

План: Понятие ЖХ; Оборудование Высокоэффективная жидкостная хроматография; Список неподвижных фаз; Механизм разделения Нормально-фазовая хроматогрофия Обращенно-фазовая хр-я Разновидность детекторов Методика детекторов Используемые формулы в ЖХ Идентификация Количественное определение Контроль примесей Условия хроматографического анализа Источники

Слайд 3

Описание слайда:

Жидкостная хроматография (ЖХ) Это метод хроматогрофического разделения, основанный на разности распределения веществ между двумя несмешивающимися фазами, в котором жидкость, являющаяся подвижной фазой, проходит через неподвижную фазу, находящуюся в колонке.

Слайд 4

Описание слайда:

ЖХ основана на механизмах:

Слайд 5

Описание слайда:

Оборудование: Оборудование состоит из насосной системы, устройства ввода проб, хроматографической колонки (допускается использование термостата для колонки), детектора и регистрирующего устройства (интегратора и самописца). Подвижная фаза, обычно подаваемая под давлением из одной или нескольких емкостей, протекает через устройство ввода пробы,колонку,а затем через детектор с заданной скоростью.

Слайд 6

Описание слайда:

Слайд 7

Описание слайда:

Слайд 8

Описание слайда:

Насосная система В ЖХ насосная система необходима для доставки подвижной фазы с постоянной скоростью потока. Перепады давления должны быть сведены к минимуму, например, путем прохождения растворителя под давлением через демпферное устройство. Система труб и соединений должны выдерживать давление, развиваемое насосной системой. Допускается использование в ЖХ насосов, оснащенных устройством для «прокачки» пузырьков захваченного воздуха. Микропроцессоры, представляющие собой контролирующую систему, подают подвижную фазу или постоянного(изократическое элюирование), или переменного(градиентное элюирование) состава в соответствии с задаваемой программой. В случае градиентного элюирования насосные системы доставляют из нескольких резервуаров растворители, смешивание которых происходит либо при низком, либо высоком давлении, создаваемом насосами.

Слайд 9

Описание слайда:

Устройство ввода проб (инжекторы) Пробу раствора вводят в движущуюся подвижную фазу в верхнюю часть колонки или рядом с ней с помощью устройства ввода проб, работающего при высоком давлении. Используют закрепленные петли и устройство с меняющимся объемом, которые действуют вручную или автоматически. Заполнение петель в ручную снижает точность введения объема.

Слайд 10

Описание слайда:

Колонки с внутренним диаметром менее 2мм часто относят к микроколонком. Колонки с внутренним диаметром менее 2мм часто относят к микроколонком. Температура подвижной фазы и колонки должна быть постоянной в течение анализа. Чаще всего разделение проводят при комнатной температуре, допускается нагревание колонки для повышения ее эффективности, но не более 60 градусов из-за завозможности уменьшения потенциала неподвижной фазы или изменения состава подвижной фазы.

Слайд 11

Описание слайда:

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ): Метод ВЭЖХ разработан в 1960-х гг. Ш.Хорватом (США) и, независимо от него, Г.Киркландом (Англия) -Это вариат ЖХ, когда по колонке с сорбентом проходит подвижная фаза под высоким давлением, в которой вещества растворяются лучше и быстрее продвигаются.

Слайд 12

Описание слайда:

Используется для качественного и количественного анализа смесей органических веществ в следующих областях:

Слайд 13

Описание слайда:

Слайд 14

Описание слайда:

Слайд 15

Описание слайда:

Слайд 16

Описание слайда:

Слайд 17

Описание слайда:

Слайд 18

Описание слайда:

По ГФ РК в качестве неподвижных фаз используют:

Слайд 19

Описание слайда:

Слайд 20

Описание слайда:

Механизм разделения основан на использовании в качестве

Слайд 21

Описание слайда:

На поверхности носителя, такого, как, например, кремнезем имеются силанольные группы, которые, взаимодействуя с различными силановыми реагентами, образуют ковалентно связанные силилированные производные, покрывающие различное число активных центров на его поверхности. На поверхности носителя, такого, как, например, кремнезем имеются силанольные группы, которые, взаимодействуя с различными силановыми реагентами, образуют ковалентно связанные силилированные производные, покрывающие различное число активных центров на его поверхности.

Слайд 22

Описание слайда:

Природа функционально привитой фазы является важным параметром, определяющим разделительные свойства хроматографической системы. Наиболее часто используют следующие функционально привитые фазы: Природа функционально привитой фазы является важным параметром, определяющим разделительные свойства хроматографической системы. Наиболее часто используют следующие функционально привитые фазы: Октил –Si-⊏CH2⊐7–CH3 C8 Октадецил -Si-⊏CH2⊐17-CH3 C18 Фенил –Si-⊏CH2⊐-C6H5 C6H5 Цианопропил –Si-⊏CH2⊐3-СN СN Аминопропил –Si-⊏CH2⊐3-NH2 NH2 Диол –Si-⊏CH2⊐3-О-CH(OH)-CH2-OH O-CH(OH)-CH2-OH

Слайд 23

Описание слайда:

Слайд 24

Описание слайда:

В определенных случаях в нормально-фазовой хроматографии применяют неполярную подвижную фазу, а в качестве неподвижной фазы: В определенных случаях в нормально-фазовой хроматографии применяют неполярную подвижную фазу, а в качестве неподвижной фазы: немодифицированный кремнезем, пористый графит, полярный химически модифицированный кремнезем с такими группами как, цианопропил или диол

Слайд 25

Описание слайда:

Частицы для большинства используемых неподвижных фаз имеют

Слайд 26

Описание слайда:

В случае обращенных фаз дополнительным фактором являются природа неподвижной фазы и степень связывания активных центров, например, содержание углерода или эндкепирование (силилирование оставшихся силанольных групп). Наличие остаточных силанольных групп обуславливает размытость пиков, особенно основных веществ. В случае обращенных фаз дополнительным фактором являются природа неподвижной фазы и степень связывания активных центров, например, содержание углерода или эндкепирование (силилирование оставшихся силанольных групп). Наличие остаточных силанольных групп обуславливает размытость пиков, особенно основных веществ.

Слайд 27

Описание слайда:

Слайд 28

Описание слайда:

Слайд 29

Описание слайда:

В качестве детекторов применяют спектрофотометры В качестве детекторов применяют спектрофотометры В УФ Видимой области, включающие диодный набор детекторов Допускается использование: Флуоресцентных спектрофотометров Дифференциальных рефрактометров Электрохимических детекторов Масс-спектрометров Светорассеивающих Радиоактивных и других спец. детекторов

Слайд 30

Описание слайда:

Методика Колонку уравновешивают с подвижной фазой и скоростью потока до установления устойчивого исходного состояния при комнатной температуре или температуре, указанной в частной статье. Готовят испытуемый раствор(ы) и раствор(ы) сравнения в соответствии с описанием в частной статье. Растворы не должны содержать твердых частиц. Используя растворы сравнения, настраивают прибор и подбирают объемы вводимых проб, которые позволяют получить необходимый(адекватный) сигнал. Выполняют повторные введения для проверки сходимости сигнала и проверяют при необходимости число теоретических тарелок.

Слайд 31

Описание слайда:

Вводят растворы и регистрируют результаты хроматографирования. Для проверки сходимости сигнала выполняют повторные введения. Определяют площади пиков анализируемых компонентов. В случае, если коэффициент симметрии, вычисленный, как описано ниже, имеет значение от 0.8 до 1,20, допускается проводить определение по высоте пиков. При использовании градиентного элюирования необходимо проводить определение поплощадям пиков. При использовании внутреннего стандарта следует удостовериться, что ни один из пиков анализируемого вещества или его примеси не маскируется пиком внутреннего стандарта. Вводят растворы и регистрируют результаты хроматографирования. Для проверки сходимости сигнала выполняют повторные введения. Определяют площади пиков анализируемых компонентов. В случае, если коэффициент симметрии, вычисленный, как описано ниже, имеет значение от 0.8 до 1,20, допускается проводить определение по высоте пиков. При использовании градиентного элюирования необходимо проводить определение поплощадям пиков. При использовании внутреннего стандарта следует удостовериться, что ни один из пиков анализируемого вещества или его примеси не маскируется пиком внутреннего стандарта.

Слайд 32

Описание слайда:

Из полученных значений вычисляют содержание определяемого компонента или компонентов. Если указано в частной статье, процентное содержание одного или нескольких компонентов анализируемой пробы определяют посредством вычисления процентной доли площади соответствующего пика или пиков к суммарной площади всех пиков, исключая пики растворителей или добавленных реактивов(метод внутренней нормализации). В этих случаях рекомендуется использование широкодиапазонного усилителя и автоматического интегратора. Из полученных значений вычисляют содержание определяемого компонента или компонентов. Если указано в частной статье, процентное содержание одного или нескольких компонентов анализируемой пробы определяют посредством вычисления процентной доли площади соответствующего пика или пиков к суммарной площади всех пиков, исключая пики растворителей или добавленных реактивов(метод внутренней нормализации). В этих случаях рекомендуется использование широкодиапазонного усилителя и автоматического интегратора.

Слайд 33

Описание слайда:

Коэффицент симметрии пика Где b(0.05)-ширина пика на одной двадцатой высоты пика; A-расстояние между перпендикуляром, опущенным из максимума пика, и передней границей пика на одной двадцатой высоты пика.

Слайд 34

Описание слайда:

Коэффициент разделения (R(s))

Слайд 35

Описание слайда:

Число теоретических тарелок (n) может быть получено из данных, полученных в изократическом режиме

Слайд 36

Описание слайда:

Коэффициент емкости (коэф. распределения масс)

Слайд 37

Описание слайда:

Слайд 38

Описание слайда:

Отношение сигнал/шум (S/H)

Слайд 39

Описание слайда:

Слайд 40

Описание слайда:

Идентификацию проводят одним из способов: Сравнение времен удерживания анализируемого вещества в испытуемой пробе и растворе сравнения; Сравнение относительных времен удерживания анализируемого вещества в испытуемой пробе и растворе сравнения; Сравнение хроматограммы испытуемой пробы с хроматограммой раствора сравнения или с хроматограммой, приведенной в частной статье. (В большинстве случаев используют 1 способ. 2 способ используют при плохой воспроизводимости условий хроматографирования. 3 способ оптимален для препаратов растительного и животного происхождения)

Слайд 41

Описание слайда:

Количественное определение Проводят методами: Абсолютной калибровки (для испытуемого р-ра и р-ра сравнения рассчитывают средние значения площадей или высот пиков анализируемого в-ва. По полученным средним значениям рассчитывают концентрацию анализируемого в-ва в испытуемом р-ре) Внутреннего стандарта (для каждой хроматограммы рассчитывают отношение площади или высоты пика анализируемого в-ва к площади или высоте пика внутреннего стандарта. Полученные отношения усредняют для испытуемого р-ра и р-ра сравнения и по найденным средним значениям определяют концентрацию анализируемого в-ва в испытуемом р-ре)

Слайд 42

Описание слайда:

Контроль примесей Для контроля примесей используют следующие подходы: Количественное определение примеси с использованием р-ра сравнения с известной концентрацией примеси (обычно в варианте абсолютной калибровки) Способ внутренней нормализации Сравнение с разбавленным р-м основного в-ва Способ стандартных добавок

Слайд 43

Описание слайда:

Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы». Данный тест обычно проводят с использованием р-в сравнения.

Слайд 44

Описание слайда:

Условия хроматографического анализа Размеры хроматографической колонки и материал,из которого она изготовлена; ~тип неподвижной фазы и при необходимости ее коммерческую марку; ~размер частиц неподвижной фазы; ~при использовании предколонки теже сведения указываются для нее ~температуру колонки, ~скорость потока и состав подвижной фазы; ~в случае использования градиента-программу его изменения; ~тип детектора.