Методы разделения белковых смесей. Хроматография - презентация, доклад, проект скачать

Нажмите для полного просмотра!

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №1

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №2

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №3

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №4

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №5

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №6

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №7

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №8

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №9

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №10

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №11

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №12

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №13

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №14

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №15

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №16

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №17

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №18

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №19

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №20

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №21

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №22

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №23

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №24

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №25

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №26

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №27

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №28

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №29

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №30

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №31

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №32

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №33

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №34

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №35

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №36

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №37

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №38

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №39

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №40

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №41

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №42

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №43

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №44

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №45

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №46

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №47

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №48

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №49

Методы разделения белковых смесей. Хроматография, слайд №50

Содержание ▲

Вы можете ознакомиться и скачать презентацию на тему Методы разделения белковых смесей. Хроматография. Доклад-сообщение содержит 50 слайдов. Презентации для любого класса можно скачать бесплатно. Если материал и наш сайт презентаций Mypresentation Вам понравились – поделитесь им с друзьями с помощью социальных кнопок и добавьте в закладки в своем браузере.

Слайды и текст этой презентации

Слайд 1

Описание слайда:

Методы разделения белковых смесей Хроматография Лекция 4

Слайд 2

Описание слайда:

План лекции Методы разделения белковых смесей Основные принципы хроматографии ВЭЖХ Инструментальное обеспечение

Слайд 3

Описание слайда:

Методы разделения белковых смесей Высокоэффективная жидкостная хроматография разделение по заряду, молекулярной массе, степени гидрофобности, специфическом взаимодействии с носителем Электрофорез в ПААГ в присутствии додецилсульфата натрия разделение по величине молекулярных масс Изоэлектрофокусирование разделение по величине изоэлектрических точек Двумерный электрофорез изоэлектрическая точка+молекулярная масса Иммуноблоттинг (Вестерн-блоттинг) - визуализация детекция при помощи антител

Слайд 4

Описание слайда:

Высокоэффективная жидкостная хроматография

Слайд 5

Описание слайда:

Хроматография

Слайд 6

Описание слайда:

История

Слайд 7

Описание слайда:

Виды хроматографии

Слайд 8

Описание слайда:

По способу введения пробы Элюентная хроматография (проявительная) Наиболее часто используемый вариант проведения аналитической хроматографии. Анализируемую смесь вводят в поток элюента в виде импульса . В колонке смесь разделяется на отдельные компоненты, между которыми находятся зоны подвижной фазы. Фронтальная хроматография Смесь непрерывно подают в колонку, при этом на выходе из колонки только первый, наименее удерживаемый компонент можно выделить в чистом виде. Остальные зоны содержат 2 и более компонентов. Родственный метод — твердофазная экстракция (сорбционное концентрирование). Вытеснительная хроматография В колонку после подачи разделяемой смеси вводят специальное вещество-вытеснитель, которое удерживается сильнее любого из компонентов смеси. Образуются примыкающие друг к другу зоны разделяемых веществ.

Слайд 9

Описание слайда:

ТФЭ (SPE)

Слайд 10

Описание слайда:

ТФЭ Назначение ТФЭ: очистка пробы от нежелательных примесей, концентирование компонентов пробы, перевод компонентов пробы на другую матрицу. Основные методы ТФЭ: одностадийная очистка, когда все нежелательные компоненты пробы собираются на сорбенте, а аналит собирается двухстадийная очистка и концентрирование, когда проба наносится на патрон вместе с нежелательнимы примесями, а потом с помощью более сильного элюента смывается аналит. Все нежелательные примеси остаются на сорбенте. трехстадийная очистка и концентрирование: на первом этапе все компоненты наносятся на патрон, на втором смываются легкие нежелательные компоненты, на третьем смывается аналит. Все тяжелые нежелательные примеси остаются на сорбенте.

Слайд 11

Описание слайда:

По агрегатному состоянию фаз Газовая хроматография Газо-жидкостная хроматография Газо-твёрдофазная хроматография Жидкостная хроматография Жидкостно-жидкостная хроматография Жидкостно-твёрдофазная хроматография Жидкостно-гелевая хроматография Сверхкритическая флюидная хроматография

Слайд 12

Описание слайда:

По механизму взаимодействия Распределительная хроматография Ионообменная хроматография Адсорбционная хроматография Эксклюзионная хроматография Аффинная хроматография Осадочная хроматография Адсорбционно-комплексообразовательная хроматография

Слайд 13

Описание слайда:

Распределительная хроматография хроматографический метод, при котором неподвижная (стационарная) фаза химически связана с поверхностью неподвижного носителя. Подвижной фазой является жидкость (LLC — англ. liquid liquid chromatography), которая служит растворителем, или газ (газовая хроматография). Разделение происходит за счёт различия полярности разделяемых веществ. Частным случаем распределительной хроматографии является обращённо-фазная хроматография.

Слайд 14

Описание слайда:

Ионобменная хроматография хроматографии позволяет разделять ионы и полярные молекулы, на основании зарядов разделяемых молекул. Данный вид хроматографии позволяет разделить практически любые заряженные молекулы, в том числе: крупные — белки, малые—молекулы нуклеотидов и аминокислот. Часто ионообменная хроматография используют как первый этап очистки белков. Принцип ионообменной хроматографии Ионообменная хроматография позволяет разделить молекулы, основываясь на ионных взаимодействиях. Неподвижная фаза имеет заряженные функциональные группы, которые взаимодействуют с анализируемыми ионизированными молекулами противоположного заряда. Этот вариант хроматографии классифицируется на два типа — катионную и анионную ионообменную хроматографию: Катионная ионообменная хроматография задерживает положительно заряженные катионы, так как неподвижная фаза имеет отрицательно заряженные функциональные группы, например, фосфат (PO43−). Анионная ионообменная хроматография задерживает отрицательно заряженные анионы, так как неподвижная фаза имеет положительно заряженные функциональные группы, например, +N(R)4.

Слайд 15

Описание слайда:

Адсорбционная хроматография вид хроматографии, основанный на способности твёрдого вещества — неподвижной фазы — сорбировать примеси, находящиеся в подвижной фазе. Эффективность разделения примесей пропорциональна их величинам адсорбции при условиях эксперимента. Процесс взаимодействия может сопровождаться химическим взаимодействием примесей с неподвижной фазой, то есть хемосорбцией.

Слайд 16

Описание слайда:

Эксклюзионная хроматографии (гель-фильтрация) молекулы веществ разделяются по размеру за счёт их разной способности проникать в поры неподвижной фазы. Первыми выходят из колонки наиболее крупные молекулы (бо́льшей молекулярной массы), способные проникать в минимальное число пор стационарной фазы. Последними выходят вещества с малыми размерами молекул, свободно проникающие в поры. ! при гель-фильтрации стационарная фаза остается химически инертной и с разделяемыми веществами не взаимодействует.

Слайд 17

Описание слайда:

Эксклюзионная хроматографии (гель-фильтрация) Объем образца лимитирующий для качества хроматографии Аналитическое разделение: не более 0,1% Vc Препаративное разделение: не более 8-10% Vc

Слайд 18

Описание слайда:

Аффинная хроматография

Слайд 19

Описание слайда:

По назначению аналитическая (динамический диапазон) препаративная (10 мг – 10 г) промышленная (тонны)

Слайд 20

Описание слайда:

ВЭЖХ

Слайд 21

Описание слайда:

ВЭЖХ Милихром

Слайд 22

Описание слайда:

ВЭЖХ HP

Слайд 23

Описание слайда:

ВЭЖХ Люмекс

Слайд 24

Описание слайда:

ВЭЖХ Чешский прибор

Слайд 25

Описание слайда:

Слайд 26

Описание слайда:

Слайд 27

Описание слайда:

Основные узлы хроматографа Дегазатор подвижной фазы Насос высокого давления + градиентный смеситель Система инжекции (автосэмплер) Колонка Детектор Коллектор фракций

Слайд 28

Описание слайда:

Слайд 29

Описание слайда:

Подвижная фаза Обращеннофазовая хроматография метанол ацетонитрил вода ТГФ

Слайд 30

Описание слайда:

Насос

Слайд 31

Описание слайда:

Инжектор

Слайд 32

Описание слайда:

Колонка

Слайд 33

Описание слайда:

Слайд 34

Описание слайда:

Требования к сорбенту

Слайд 35

Описание слайда:

Сорбенты

Слайд 36

Описание слайда:

Виды детекторов ультрафиолетовый (УФ, UV) диодноматричный (PDA) рефрактометрический флуоресцентный кондуктометрический детектор радиоактивности масс-спектрометрический (МС, MS)

Слайд 37

Описание слайда:

Детекторы

Слайд 38

Описание слайда:

Слайд 39

Описание слайда:

Параметры

Слайд 40

Описание слайда:

Параметры

Слайд 41

Описание слайда:

Объем

Слайд 42

Описание слайда:

Время

Слайд 43

Описание слайда:

Эффективность

Слайд 44

Описание слайда:

Параметры эффективности

Слайд 45

Описание слайда:

Смысл

Слайд 46

Описание слайда:

Селективность

Слайд 47

Описание слайда:

Селективность

Слайд 48

Описание слайда:

Параметры пиков

Слайд 49

Описание слайда:

Эффективность и селективность

Слайд 50

Описание слайда:

Заключение ВЭЖХ – мощный метод анализа сложных смесей Наиболее часто используется обращенно-фазовая ВЭЖХ Хроматограф включает следующие узлы Дегазатор подвижной фазы Градиентный смеситель Насос Инжектор Колонка Детектор Коллектор фракций