🗊Презентация Спектрофлуориметрия

Спектрофлуориметрия Попова Александра М8113

Флуориметрия (молекулярная эмиссионная спектроскопия) это физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров излучения молекул в ультрафиолетовой (200-400 нм), видимой (400-760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра которое возникает при облучении вещества светом с определенной длиной волны или в результате химической реакции. Флуориметрия (молекулярная эмиссионная спектроскопия) это физико-химический метод исследования растворов и твёрдых веществ, основанный на изучении спектров излучения молекул в ультрафиолетовой (200-400 нм), видимой (400-760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра которое возникает при облучении вещества светом с определенной длиной волны или в результате химической реакции.

В зависимости от способа возбуждения люминофора различают:

Флуориметрия и спектрофлуориметрия. Флуориметрия и спектрофлуориметрия. Под первым методом понимают количественный анализ при фиксированной длине волны возбуждающего излучения. Второй метод предполагает сканирование как по длине волны возбуждения, так и по длине волны флуоресценции. Среди приборов также выделяют флуориметры (приборы, которые на канале возбуждения и/или флуоресценции имеют простой светофильтр) спектрофлуориметры (приборы со сканирующими монохроматорами в обоих каналах).

Общая схема спектрофлуориметра

Три типа образцов: Три типа образцов: а) разбавленные растворы или газы, для которых поглощение возбуждающего света мало для всех исследуемых длин волн; стеклообразные замороженные растворы; б) концентрированные растворы; в) непрозрачные твердые тела и кристаллические или заморозамороженные при низкой температуре растекавшиеся растворы, непрозрачные жидкие растворы.

Общая схема спектрофлуориметра

Монохроматор Монохроматор

Общая схема спектрофлуориметра

Общая схема спектрофлуориметра

Общая схема спектрофлуориметра

Спектрофлуориметрия: практические аспекты Чувствительность фотоприемников зависит от длины волны света. Для получения истинного спектра флуоресценции измеренные зависимости интенсивности от длины волны должны быть исправлены с учетом спектральной чувствительности фотоприемника. Интенсивность возбуждающего света также зависит от длины волны. Для получения истинного спектра возбуждения флуоресценции прибор должен иметь канал сравнения, в который помещают вещество, играющее роль счетчика фотонов. Эффект внутреннего фильтра. Если оптическая плотность исследуемого образца мала (< 0.1), то интенсивность флуоресценции примерно одинакова в любой точке вдоль пути возбуждающего света через образец. Вторичное поглощение. Еще один эффект, который может приводить к ошибкам измерения флуоресценции – вторичное поглощение (реабсорбция). Эффект реабсорбции возникает, если спектры поглощения и флуоресценции перекрываются и оптическая плотность образца в области перекрывания значительна.

Устройство спектрофлуориметра Флюорат-02-Панорама

В флуориметрах используется сравнительно простая электроника. Спектрофлуориметрические методы обладают высокой чувствительностью и позволяют работать с крайне малыми концентрациями вещества Чувствительность флуориметров легко менять в широком диапазоне, усиливая ток фотоумножителя. Спектрофлуориметры обладают хорошей спектральной селективностью, поскольку благодаря стоксовому сдвигу можно использовать два монохроматора — один настроенный на длину волны возбуждающего света, а другой — на длину волны флуоресценции. Во флуориметре не требуется кюве­ты сравнения, но надо иметь калибровочную кривую.

Список литературы: http://chem.msu.su/rus/vmgu/145/281.pdf - ВОЗМОЖНОСТИ СПЕКТРОФЛУОРИМЕТРА «ФЛЮОРАТ-02-ПАНОРАМА» В АНАЛИЗЕ СМЕСИ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ Е.М. Басова*, В.М. Иванов, О.К. Апендеева* http://referatwork.ru/category/obrazovanie/view/597138_spektrofluorimetry - Спектрофлуориметрия: практические аспекты Эмануэль Н.М., Кузьмин М.Г. Экспериментальные методы химической кинетики http://www.lumex.ru/catalog/flyuorat-02-panorama.php - Анализатор жидкости «ФЛЮОРАТ®-02-ПАНОРАМА» http://www.agilent.com/en-us/products/fluorescence/fluorescence-systems/cary-eclipse-fluorescence-spectrophotometer - Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotometer https://studfiles.net/preview/4372705/page:2/ - Спектрофлуориметры https://megalektsii.ru/s16446t6.html - Спектрофлуориметрия. https://lektsia.com/7x482a.html - Спектрофотометрия. Спектрофлуориметрия.

Спасибо за внимание!